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Roche/11684795910 / In Situ Cell Death Detection Kit, Fluorescein現(xiàn)貨
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Roche/11684795910 / In Situ Cell Death Detection Kit, Fluorescein現(xiàn)貨

價格: ￥3800.00 市場價: 5320.00
貨號: 11684795910
品牌: Roche
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      • 詳細(xì)信息：

      • InSituCellDeathDetectionKit,Fluorescein 現(xiàn)貨供應(yīng)

        Kitforthedetectionandquantificationofapoptosis(programmedcelldeath)atthesingle-celllevel,basedonlabelingofDNAstrandbreaks(TUNELtechnology):Analysisbyfluorescencemicroscopyorflowcytometry

        Application

        Qualitativedetectionofapoptosisatthesingle-celllevelbyfluorescencemicroscopyandquantitativedetectionbyflowcytometry.

        Benefits

        ProductDescription

        Samplematerial: CellsinsUSPension,cytospinandcellsmearpreparations,adherentcellsgrownonslides,andfrozenandparaffin-embeddedtissuesections.

        BackgroundInformation

        WidelyusedmethodstodetermineapoptosisincludetheanalysisofthegenomicDNAbyagarose-gelelectrophoresisandDNAfragmentationassaysbasedon 3H-thymidineand,alternatively,5-Bromo-2-deoxy-uridine.Themethodsinvolvetheseparationoffragmented,lowmolecularweightDNAfromunfragmented,highmolecularweightDNAinagivencellpopulation.Thus,thesemethodsdonotprovideinformationaboutthefateofanindividualcellinagivencellpopulation,orparticularly,intissuesections.Alternatively,individualapoptoticcellsmaybemicroscopicallyrecognizedbecauseofthecharacteristicappearanceofnuclearchromatincondensationandfragmentation,butthismethodissubjectiveandlimitedtoarelativelynarrowtimewindowwhenthemorphologicalchangesareatamaximum.
        ThehallmarkofapoptosisisDNAdegradation,whichinearlystages,isselectivetotheinternucleosomalDNAlinkerregions.TheDNAcleavagemayyielddouble-strandedandsingle-strandedDNAbreaks(nicks).Bothtypesofbreakscanbedetectedbylabelingthefree3-OHterminiwithmodifiednucleotides(e.g., biotin-dUTP,DIG-dUTP,fluorescein-dUTP)inanenzymaticreaction.Theenzymeterminaldeoxynucleotidyltransferase(TdT)catalyzesthetemplate-independentpolymerizationofdeoxyribonucleotidestothe3-endofsingle-anddouble-strandedDNA.ThismethodhasalsobeentermedTUNEL(TdT-mediateddUTP-X nick end labeling).Alternatively,free3-OHgroupsmaybelabeledusingDNApolymerasesbythetemplate-dependentmechanismcallednicktranslation.However,theTUNELmethodisconsideredtobemoresensitiveandfaster.

        Contents

        Principle

        The InSitu CellDeathDetectionKitFluorescein isbasedonthedetectionofsingle-anddouble-strandedDNAbreaksthatoccurattheearlystagesofapoptosis.
        ApoptoticcellsarefixedandpermeABIlized.Subsequently,thecellsareincubatedwiththeTUNELreactionmixturethatcontainsTdTandfluorescein-dUTP.Duringthisincubationperiod,TdTcatalyzestheadditionoffluorescein-dUTPatfree3-OHgroupsinsingle-anddouble-strandedDNA.Afterwashing,thelabelincorporatedatthedamagedsitesoftheDNAisvisualizedbyflowcytometryand/orfluorescencemicroscopy.

        • Sensitive: Thedirectlabelingprocedureusingfluorescein-dUTPreducesbackgroundlabeling

        • Fast: Theuseoffluorescein-dUTPallowsanalysisofthesamplesdirectlyaftertheTUNELreaction

        • Convenient: Nosecondarydetectionsystemrequired

        • Accurate: Identificationofapoptosisatamolecularlevel(DNA-strandbreaks)andidentificationofcellsattheveryearlystagesofapoptosis

        1. EnzymeSolution(TdT),5vials

        2. LabelSolution(fluorescein-dUTP),5vials
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