產(chǎn)品概述：產(chǎn)品參數(shù) 外觀：可溶于 DMSO 的白色或淺黃色固體 CAS 號：150347-59-4 Ex/Em：494/521 nm（pH=7） 分子式：C29H19NO11 分子量：557.47 儲存條件 -20℃ 避光保存，有效期見外包裝。 產(chǎn)品介紹 5(6)-CFDA, SE 是一種可對活細胞進行熒光標記的細胞示蹤染料，不僅可用于細胞增殖的體外實驗，還可用于追蹤細胞在體內(nèi)的分裂增殖過程。 5(6)-CFDA, SE 是二乙酸熒光素（Fluorescein diacetate，F(xiàn)DA）的衍生物，具有細胞膜滲透性，本身不具有熒光發(fā)光性。當通過被動運輸穿透細胞膜進入活細胞后，被胞漿內(nèi)的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（carboxyfluoresceinsuccinimidyl ester，CFSE），可發(fā)強烈的綠色熒光，不能穿透細胞膜，能完好的保留在胞內(nèi)。CFSE 還可自發(fā)并不可逆地與細胞內(nèi)的氨基結(jié)合從而偶聯(lián)到細胞蛋白質(zhì)上，同時過量且未被偶聯(lián)的 5(6)-CFDA, SE通過被動擴散回到細胞外培養(yǎng)基內(nèi)，被后續(xù)清洗步驟所清除。經(jīng) 5(6)-CFDA, SE 標記的非分裂細胞的熒光非常穩(wěn)定，穩(wěn)定標記的時間可達數(shù)月，因此非常適用于細胞群落分析。 5(6)-CFDA, SE 標記細胞的熒光非常均一，優(yōu)于以前使用的其他細胞示蹤熒光探針如 PKH 26，并且分裂后的子代細胞的熒光分配也很均一。在細胞分裂增殖過程中，CFSE標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，熒光強度變?yōu)橛H代細胞的一半，通過流式細胞儀（FL1 通道）根據(jù)熒光強度的不同，可檢測出未分裂細胞，分裂一次（1/2 的熒光強度），二次（1/4 的熒光強度），三次（1/8 的熒光強度），以及更多分裂次數(shù)的細胞。5(6)-CFDA, SE 可檢測分裂次數(shù)多達八次甚至更多。經(jīng) 5(6)-CFDA, SE 標記的細胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究 ，且具有不會使鄰近細胞染色的功能 。5(6)-CFDA, SE 最常用于淋巴細胞的增殖檢測，也可用于成纖維細胞，自然殺傷細胞，造血祖細胞等其他細胞的增殖檢測。 5(6)-CFDA, SE 標記細胞呈綠色熒光，除了流式細胞儀檢測細胞增殖外，還可用熒光酶標板定量活細胞數(shù)目，或者用熒光顯微鏡進行均一染色的細胞示蹤觀察。注意事項 1. 5(6)-CFDA, SE 與胺基反應，所以實驗過程中不可使用含胺的緩沖液。 2. 熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。 3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
說明書：
UE-C4070 常見問題解答：◆細胞追蹤有很多產(chǎn)品，該如何選擇？首先確定追蹤細胞的時間，然后考慮染料結(jié)合機制。1.鈣黃綠素染料（C4041）標記均勻且對短期細胞遷移示蹤效果極佳，但也會被某些類型細胞迅速外排。2.親脂性的花青素染料，如DiI（D4010），DIO（D4007），DiA(D4059)，DiD(D4019)，DiR(D4006)能標記細胞膜而不破壞其功能，并且能持續(xù)更長時間，但如果發(fā)生膜融合則可能會染上其他細胞。此外，它們還會在透化過程中丟失。3.CellTracker染料（C4060）更有利于長期標記，其帶有溫和的氯甲基反應基團使之能夠與細胞組分共價結(jié)合。4.CFDA SE（C4070）也能共價地結(jié)合于細胞組分。在所有列出的試劑中，細胞內(nèi)保留與否取決于細胞分裂的速率和細胞的固有特性（主動外排，膜和蛋白質(zhì)的周轉(zhuǎn)率等）。其中共價結(jié)合試劑比非共價結(jié)合的試劑展現(xiàn)出更長的保留時間 ◆CFDA SE能否用于干細胞的增殖檢測?CFDA SE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒可以用于各種常見細胞的增殖和示蹤檢測，包括干細胞、神經(jīng)細胞等◆稱量粉末的時候需要避光嗎？建議避光的◆該產(chǎn)品是無菌的嗎？是粉末，用DMSO配制母液，不需要做過濾除菌
使用本產(chǎn)品的文獻：參考文獻1.5,6-carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester-labeled apoptotic and necrotic as well as detergent-treated cells can be traced in composite cell samples.應用方向：除追蹤活細胞外，還可以用來追蹤復合樣本中的死亡細胞2.Vascularized organoid engineered by modular assembly enables blood perfusion應用方向：標記HepG2細胞進行共培養(yǎng)3.Decreased proliferative capability of CD4(+) cells of elderly people is associated with faster loss of activation-related antigens and accumulation of regulatory T cells.應用方向：染色組織塊上采集的靜脈血中分離出的外周血單個核細胞（PBMC）4.Glioma stem cells promote radioresistance by preferential activation of the DNA damage response.應用方向：對原發(fā)性膠質(zhì)母細胞瘤T3590進行標記5.Deletion of a coordinate regulator of type 2 cytokine expression in mice.應用方向：標記CD4+T細胞
6.Fluorescent labeling of nano-sized vesicles released by cells and subseqUEnt quantitative and qualitative analysis by high-resolution flow cytometry.應用方向：使用CFSE進行標記的外泌體可以用于后續(xù)FACS、NTA和顯微鏡觀察使用
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