產(chǎn)品概述:產(chǎn)品參數(shù) 外觀:可溶于水的淺黃色固體 Ex/Em:328/533 nm CAS號:103404-75-7 分子式:C11H7N2NaO3S2 分子量:302.3儲存條件 -20℃干燥避光保存,有效期見外包裝。 產(chǎn)品介紹活體成像技術(shù)(optical in vivo imaging)目前主要采用生物發(fā)光(bioluminescence)與熒光(fluorescence)兩種技術(shù),生物發(fā)光法是基于螢光素酶能催化底物化學發(fā)光的原理,將體外能穩(wěn)定表達螢光素酶的細胞株植入動物體內(nèi),與后期注射入體內(nèi)的底物發(fā)生反應(yīng),利用光學系統(tǒng)檢測光強度,間接反映出細胞數(shù)量的變化或細胞的定位。這項技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于多個領(lǐng)域,最常用的有腫瘤或疾病動物模型的建立,并可用于病毒學研究、siRNA研究、干細胞研究、蛋白質(zhì)相互作用研究等。D-Luciferin是螢光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整個生物技術(shù)領(lǐng)域,特別是體內(nèi)活體成像技術(shù)。在ATP和螢光素酶的作用下,螢光素能夠被氧化,并且在560 nm檢測到其化學發(fā)光。Luciferin由luc基因編碼,該基因作為報告基因在多種細胞中存在。由于化學發(fā)光的低背景性,luc基因在很低的表達水平下就可以被監(jiān)測到。此外,螢光素/螢光素酶被用來測量10-15摩爾量的ATP。 注意事項
1. D-Luciferin , Sodium Salt樣品的背景熒光主要來源于螢光素,如果不立即使用本產(chǎn)品,建議分裝后,-20℃避光保存。
說明書:UE-D1007S/D1007L MSDS:MSDS D1007 D-Luciferin, sodium salt
常見問題解答:◆底物的激發(fā)波長和發(fā)射長?化學發(fā)光,無需激發(fā)波長。螢火蟲螢光素發(fā)射波長是 560 nm。◆推薦儀器?多功能酶標儀能用嗎?1、推薦儀器:具有生物化學發(fā)光檢測模塊。螢光素產(chǎn)生的光可以被光度計或閃爍計數(shù)器檢測。常見的活體成像儀器:如 IVIS? Lumina 小動物活體成像系統(tǒng),德國 Bruker公司的 In-Vivo Xtreme 多模式小動物活體成像儀。2、多功能酶標儀:需要和儀器廠家確認是否具體生物化學發(fā)光檢測模塊。注:不能用熒光顯微鏡。◆底物可以進入活細胞中或者血腦屏障嗎?D-螢光素約280道爾頓,螢光素的水溶性和脂溶性都非常好,可以通過血腦屏障,胎盤屏障和血液測試屏障,也可以進入活細胞。◆活體成像實驗,無效果的原因?成功進行活體成像實驗需要以下條件:1)目的組織或細胞表達螢光素酶基因;2)螢光素底物注射成功;3)依賴于發(fā)光部位的組織厚度。實驗不成功,可從上述因素查找,螢光素酶基因是否表達,螢光素底物是否未正確注射,及發(fā)光部位較深等◆產(chǎn)品不小心放在室溫下或暴露在光線下了,還可以用嗎?產(chǎn)品在室溫下可以穩(wěn)定保存很多天,因此產(chǎn)品很可能仍然可以正常工作。 為安全起見,我們建議在處理大量樣品或珍貴樣品之前,先進行小規(guī)模陽性對照實驗,以確認該產(chǎn)品仍然適用于您的應(yīng)用。◆兩者的區(qū)別是什么?螢光素鉀鹽和螢光素鈉鹽應(yīng)用上沒有差別,兩者的差別在于物理性狀上如外形和溶解性。鈉鹽的水溶性高于鉀鹽。從目前發(fā)表的文獻來看,鉀鹽的使用率遠高于鈉鹽,尤其是體內(nèi)實驗,兩者功效相同。◆活體成像有必要建立螢光素酶動力學曲線嗎?注射方式,動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,因此建議每次實驗都要做螢光素酶動力學曲線,確定最佳信號平臺期和最佳的檢測時間。 使用本產(chǎn)品的文獻:1.Creating Red Light-Switchable Protein Dimerization Systems as Genetically Encoded Actuators with High SpecificityZhimin Huang, Zengpeng Li, Xiao Zhang, Shoukai Kang, Runze Dong, Li Sun, Xiaonan Fu, David Vaisar, Kurumi Watanabe,Liangcai GuACS Synth. Biol2.Antigen Capture and Immune Modulation by Bacterial Outer Membrane Vesicles as In Situ Vaccine for Cancer Immunotherapy Post-Photothermal TherapyYao Li,Kaiyue Zhang,Yao Wu,Yale Yue,Keman Cheng,Qingqing Feng,Xiaotu Ma,Jie Liang,Nana Ma,Guangna Liu,Guangjun Nie,Lei Ren,Xiao ZhaoSmall參考文獻:1.Application of the firefly luciferase reporter gene應(yīng)用方向:體外化學發(fā)光分析2.Optical imaging of Renilla luciferase reporter gene expression in living mice應(yīng)用方向:活體成像3.Real-time measurements of acetylcholine-induced release of ATP from bovine medullary chromaffin cells應(yīng)用方向:高靈敏度 ATP 分析