產(chǎn)品概述:儲(chǔ)存條件4℃避光保存,有效期見外包裝。開封后,保存溫度詳見說明書。 組分 | 24T | 48T | 96T | 使用方法 | 開封后保存條件 |
A.標(biāo)準(zhǔn)品 | 2000 pg | 2000 pg | 2×2000 pg | 按說明書進(jìn)行稀釋 | -20℃可存放一月 |
B.標(biāo)準(zhǔn)稀釋液 | 16 mL | 2×16 mL | 4×16 mL | 即用型 | 4℃可存放一月 |
C.濃縮生物素化抗體(100×) | 30 μL | 60 μL | 2×60 μL | 按說明書進(jìn)行稀釋 (現(xiàn)配現(xiàn)用) |
D.生物素化抗體稀釋液 | 16 mL | 16 mL | 16 mL | 即用型 |
E.濃縮酶結(jié)合物(避光100×) | 30 μL | 60 μL | 2×60 μL | 按說明書進(jìn)行稀釋 (現(xiàn)配現(xiàn)用) |
F.酶結(jié)合物稀釋液 | 16 mL | 16 mL | 16 mL | 即用型 |
G.濃縮洗滌液(20×) | 16 mL | 16 mL | 25mL | 即用型 |
H.顯色劑(避光) | 6 mL | 6 mL | 12mL | 即用型 |
I.終止液 | 12mL | 12mL | 12mL | 即用型 | 4℃或常溫保存 |
J.預(yù)包被96孔板 | 8×3 | 8×6 | 8×12 | 即用型 | 密封干燥4℃保存 |
K.封板膠紙 | 1張 | 2張 | 4張 | 即用型 |
注:終止液和顯色劑具有腐蝕性,一旦接觸到液體,請(qǐng)盡快用大量清水沖洗。產(chǎn)品介紹Human Adiponectin ELISA Kit (Human Adiponectin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ,即人脂聯(lián)素酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒,可以定量檢測(cè)人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣本中的天然和重組 Adiponectin 濃度。脂聯(lián)素 (Adiponectin) ,又稱 30 kD 脂肪細(xì)胞因子(Adipocyte Complement-Related Protein,Acrp 30),adipoQ,脂肪組織特有基因 (Adipose Most Abundant Gene Transcript1,apM 1)、或 28 KD 凝膠結(jié)合蛋白 (Gelatin-Binding Protein28,GBP 28),是由脂肪細(xì)胞分泌的一種特異性蛋白,主要參與維持體內(nèi)葡萄糖-脂質(zhì)平衡,循環(huán)脂聯(lián)素濃度相對(duì)較高,約占血漿總蛋白的 0.01%。脂聯(lián)素 N 端含有膠原蛋白樣結(jié)構(gòu)域,C 端具有球狀結(jié)構(gòu)域,其中包含一段與補(bǔ)體因子 C1q極為相似的序列和結(jié)構(gòu),屬于可溶性膠原超家族,與膠原Ⅷ、Χ、補(bǔ)體 C1q 和腫瘤壞死因子 (tumor necrosis factor,TNF)家族具有結(jié)構(gòu)同源性。脂聯(lián)素可形成三聚體、六聚體和更大分子量的低聚體復(fù)合物,復(fù)合物的類型不同會(huì)影響脂聯(lián)素的生物活性。在脂肪細(xì)胞分化或受到胰島素刺激時(shí)細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生脂聯(lián)素。脂聯(lián)素有 AdipoR 1 和 AdipoR 2 兩個(gè)受體,其中AdipoR 1 在骨骼肌中表達(dá)量高,AdipoR 2 則主要在肝組織中表達(dá)。將一定劑量的脂聯(lián)素注入非肥胖無糖尿病的正常小鼠體內(nèi),會(huì)導(dǎo)致其體內(nèi)胰島素非依賴性的葡萄糖水平降低,這表明脂聯(lián)素可作為胰島素敏感激素,調(diào)節(jié)甘油三酯代謝。除了正常脂聯(lián)素外,血液中還存在一種僅含 C 末端球狀結(jié)構(gòu)的短脂聯(lián)素 (gAdiponectin),這種脂聯(lián)素可以使小鼠肌肉和肝臟的重量下降,和游離脂肪酸過氧化效果一樣,調(diào)節(jié)效果明顯優(yōu)于正常脂質(zhì)素。短脂聯(lián)素脂質(zhì)過氧化中的作用可能是通過對(duì)甘油三酯代謝相關(guān)蛋白的表達(dá)和活性調(diào)控,如 CD36,acyl CoA oxidase,AMPK 和 PPARγ。肥胖和循環(huán)脂質(zhì)素間有明確的負(fù)相關(guān)關(guān)系,脂聯(lián)素水平隨著體重下降而升高。脂聯(lián)素水平下降和胰島素抵抗,胰島素過多相關(guān),Ⅱ型糖尿病患者體內(nèi)的循環(huán)脂聯(lián)素水平下降。胰島素敏感素,抗糖尿病藥噻唑霉素能提高胰島素抵抗患者體內(nèi)的脂聯(lián)素水平,脂聯(lián)素水平增高會(huì)有效降低Ⅱ型糖尿病發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。核磁共振(光譜)分析表明人肌肉細(xì)胞內(nèi)脂肪含量和脂聯(lián)素水平負(fù)相關(guān),這可能是由于脂聯(lián)素可誘導(dǎo)脂肪酸過氧化造成的。脂聯(lián)素還在抗動(dòng)脈粥樣硬化和抗炎癥方面起作用,在冠心病患者血漿中脂聯(lián)素水平會(huì)下降。脂聯(lián)素可通過體外抑制內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子的表達(dá),抑制單核細(xì)胞的附著。另外,脂聯(lián)素可負(fù)調(diào)控粒單系細(xì)胞生長(zhǎng)和巨噬細(xì)胞中TNF-a 的產(chǎn)生。
本試劑盒采用雙抗體夾心 ELISA 法檢測(cè)樣品中人Adiponectin 濃度。在人 Adiponectin 單克隆抗體預(yù)包被酶標(biāo)板中加入適度稀釋的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,其中的 Adiponectin 會(huì)與其單抗結(jié)合,洗去游離成分;加入生物素化的抗人Adiponectin 抗體,抗人 Adiponectin 抗體與結(jié)合在單抗上的人 Adiponectin 結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,洗去游離的成分;加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素,生物素與親合素特異性結(jié)合,洗去未結(jié)合的酶結(jié)合物;加入顯色劑,若反應(yīng)孔中有Adiponectin,辣根過氧化物酶會(huì)使無色的顯色劑出現(xiàn)藍(lán)色;加終止液變?yōu)辄S色。在 450 nm 下測(cè) OD 值,人 Adiponectin濃度與 OD 450 值之間呈正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中人 Adiponectin 濃度。
注意事項(xiàng)a.稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)品不可重復(fù)使用,未用完的標(biāo)準(zhǔn)品分裝,于-20℃或-80℃凍存,避免反復(fù)凍融。b. 濃縮生物素化抗體、濃縮酶結(jié)合物稀釋前請(qǐng)先離心處理,使管內(nèi)液體沉入底部。c. 不同批號(hào)試劑不可混用。d. 混勻要充分,最好使用微量振蕩器(用最低頻率進(jìn)行震蕩)。