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螞蟻淘/人單核細(xì)胞趨化蛋白1 ELISA試劑盒（Human MCP-1 ELISA KIT）/48T/H6134M
  • 螞蟻淘/人單核細(xì)胞趨化蛋白1 ELISA試劑盒（Human MCP-1 ELISA KIT）/48T/H6134M

螞蟻淘/人單核細(xì)胞趨化蛋白1 ELISA試劑盒（Human MCP-1 ELISA KIT）/48T/H6134M

價(jià)格: ￥1587.00 市場價(jià): 2645.00
貨號: H6134M
品牌: ebiomall
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  • 使用說明
  • 常見問題
    • 產(chǎn)品概述：儲(chǔ)存條件 4℃避光保存，有效期見外包裝。開封后，保存溫度詳見說明書。

      組分

      24T

      48T

      96T

      使用方法

      開封后保存條件

      A.標(biāo)準(zhǔn)品

      1000 pg

      1000 pg

      2×1000 pg

      按說明書進(jìn)行稀釋

      -20℃可存放一月

      B.標(biāo)準(zhǔn)稀釋液

      16 mL

      16 mL

      16 mL

      即用型

      4℃可存放一月

      C.濃縮生物素化抗體（100×）

      30 μL

      60 μL

      2×60 μL

      按說明書進(jìn)行稀釋

      （現(xiàn)配現(xiàn)用）

      D.生物素化抗體稀釋液

      16 mL

      16 mL

      16 mL

      即用型

      E.濃縮酶結(jié)合物（避光100×）

      30 μL

      60 μL

      2×60 μL

      按說明書進(jìn)行稀釋

      （現(xiàn)配現(xiàn)用）

      F.酶結(jié)合物稀釋液

      16 mL

      16 mL

      16 mL

      即用型

      G.濃縮洗滌液（20×）

      16 mL

      16 mL

      25mL

      即用型

      H.顯色劑（避光）

      6 mL

      6 mL

      12mL

      即用型

      I.終止液

      12mL

      12mL

      12mL

      即用型

      4℃或常溫保存

      J.預(yù)包被96孔板

      8×3

      8×6

      8×12

      即用型

      密封干燥4℃保存

      K.封板膠紙

      1張

      2張

      4張

      即用型

      注：終止液和顯色劑具有腐蝕性，一旦接觸到液體，請盡快用大量清水沖洗。

      產(chǎn)品介紹 Human MCP-1 ELISA Kit (Human Monocyte Chemoattractant Protein-1 Enzyme -Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即人單核細(xì)胞趨化蛋白 1 ELISA 試劑盒，可以定量檢測人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣本中的天然和重組 MCP-1 濃度。單核細(xì)胞趨化蛋白 1 又稱單核細(xì)胞趨化和激活因子 (MCAF)，屬于 C-C 亞族（β亞族）成員，是一種對單核細(xì)胞具有特異性趨化及激活活性的細(xì)胞因子，是吸引單核細(xì)胞浸潤到腫瘤及組織中的有效介質(zhì)。人 MCP-1 是由 76 個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成的堿性蛋白質(zhì)，基因定位于第 17 對染色體。人 MCP-1 前體蛋白有 99 個(gè)氨基酸殘基，切除 23 個(gè)氨基酸的信號肽后形成 76 氨基酸殘基的成熟 MCP-1 分子。非糖基化的 MCP-1 分子量為 8.7 kDa，經(jīng)不同糖基化后 MCP-1 分子量有 13 kDa 和 15 kDa 兩種。MCP-1 分子中 11 與 36 Cys 和 12 與 52Cys 之間所形成兩個(gè)鏈內(nèi)二硫鍵以及 Try 28 和 Arg 30，這兩個(gè)二硫鍵對于 MCP-1 的生物學(xué)活性是必需的。在氨基酸水平上，MCP-1 與另外兩種單核細(xì)胞趨化蛋白 MCP-2 (HC 14)和 MCP-3 (NC 28)分別有 62%和 72%的同源性，與 C-X-C 亞族中 IL-8 有 24％同源性。MCP-1 可由多種細(xì)胞產(chǎn)生, 如內(nèi)膜細(xì)胞、單核/巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及某些腫瘤細(xì)胞等，而這些細(xì)胞合成分泌 MCP-1，受 IL-1、TNF 等多種細(xì)胞因子的調(diào)控。MCP-1 還能誘導(dǎo)單核細(xì)胞表面粘附分子的表達(dá)及細(xì)胞因子 IL-1 和 IL-6 的表達(dá)，可調(diào)節(jié)單核細(xì)胞的多種功能。體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)均證實(shí)了 MCP-1 對單核細(xì)胞具有趨化活性，可激活單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，使其胞漿內(nèi) Ca2+濃度升高，產(chǎn)生和釋放超氧陰離子，并釋放溶菌酶，上調(diào)單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞粘附分子如 integrin 家族β 2 組和α 4 分子的表達(dá)和細(xì)胞因子 IL-1、IL-6 的產(chǎn)生，活化的巨噬細(xì)胞可抑制腫瘤細(xì)胞的生長。MCP 是嗜堿性粒細(xì)胞的趨化劑和激活劑，尤其是刺激嗜堿性粒細(xì)胞脫顆粒和組胺釋放的作用較為強(qiáng)烈。MCP-1 與 MCP-1 R 發(fā)生特異性的結(jié)合，此受體主要分布于單核細(xì)胞、髓樣前體細(xì)胞系和嗜堿性粒細(xì)胞，屬于 IL-8 R 家族。風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病人的滑液和血清中MCP-1水平明顯升高。胃癌，食管鱗狀細(xì)胞癌，惡性膠質(zhì)瘤和卵巢癌，胰腺癌，膀胱癌及乳癌幾種癌癥中MCP-1水平上調(diào)。腎臟炎癥時(shí)，IL-1誘導(dǎo)腎小球細(xì)胞產(chǎn)生MCP-1。高膽固醇血癥時(shí)，動(dòng)脈內(nèi)側(cè)平滑肌細(xì)胞產(chǎn)生高水平MCP-1，單核細(xì)胞粘附于血管壁并浸潤動(dòng)脈壁。高血脂癥時(shí)，LDL與腎小球細(xì)胞結(jié)合，刺激其產(chǎn)生 MCP-1，趨化單核細(xì)胞在局部浸潤。腎臟炎癥時(shí)，IL-1誘導(dǎo)腎小球細(xì)胞產(chǎn)生MCP-1。本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法檢測樣品中人 MCP-1濃度。在人MCP-1單克隆抗體預(yù)包被酶標(biāo)板中加入適度稀釋的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，其中的MCP-1會(huì)與其單抗結(jié)合，洗去游離成分；加入生物素化的抗人MCP-1抗體，抗人MCP-1 抗體與結(jié)合在單抗上的人MCP-1結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，洗去游離的成分；加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素，生物素與親合素特異性結(jié)合，洗去未結(jié)合的酶結(jié)合物；加入顯色劑，若反應(yīng)孔中有MCP-1，辣根過氧化物酶會(huì)使無色的顯色劑出現(xiàn)藍(lán)色；加終止液變?yōu)辄S色。在450 nm下測OD值，人MCP-1 濃度與OD 450值之間呈正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中人MCP-1濃度。
      說明書：UE-H6134S/H6134M/H6134L
      常見問題解答：◆背景信號強(qiáng)是什么原因？1.洗板不充分。將洗滌緩沖液加入孔中洗滌，確?？讌^(qū)域洗滌充分；確保已在洗滌前棄去所有殘留抗體溶液；增加洗滌次數(shù)。2.鏈親和素-HRP結(jié)合物過量。檢查偶聯(lián)物的稀釋度，在推薦的稀釋度下使用。3.封閉不充分。檢查封閉液；延長封閉時(shí)間。4.孵育時(shí)間過長。縮短孵育時(shí)間。5.樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中含干擾物質(zhì)。設(shè)置對照。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。

      ◆沒有信號？1.試劑添加順序錯(cuò)誤或試劑配制不正確。重復(fù)實(shí)驗(yàn)；檢查試劑配制方法；復(fù)核試驗(yàn)試劑添加流程。2.HRP被疊氮化合物污染。使用新鮮配制的試劑。3.抗體用量不足。檢查是否使用了推薦的抗體量；增加抗體用量（濃度）。4.使用了含胎牛血清的緩沖液復(fù)溶抗體。檢查使用的試劑。5.捕獲抗體與板結(jié)合較差。使用ELISA板，而非組織培養(yǎng)板；使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。◆整塊板呈現(xiàn)規(guī)則藍(lán)色？1.洗板不充分或跳過洗滌步驟未去除殘留的非結(jié)合過氧化物酶。嚴(yán)格按照說明書洗滌流程操作。2.底物溶液預(yù)混太早不新鮮。底物溶液混合后須立即使用。3.封板膠紙或試劑儲(chǔ)液槽重復(fù)使用導(dǎo)致HRP殘留污染。每步均需使用新的封板膠紙或試劑儲(chǔ)液槽。4.緩沖液有金屬或HRP污染。新鮮配置緩沖液。◆標(biāo)準(zhǔn)曲線差？1.鏈親和素-HRP結(jié)合物量不足。檢查倍性稀釋是否正確。2.捕獲抗體與板結(jié)合較差。使用酶標(biāo)板，而非組織培養(yǎng)板；使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。3.檢測抗體量不足。檢查稀釋度是否正確。4.孵育時(shí)間不足。延長底物溶液孵育時(shí)間。5.實(shí)驗(yàn)操作流程有誤。嚴(yán)格按照說明書操作流程。6.標(biāo)準(zhǔn)曲線稀釋計(jì)算錯(cuò)誤。重新計(jì)算制作新的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
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