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螞蟻淘/小鼠白細胞介素12 ELISA試劑盒(Mouse IL-12/23(P40) ELISA KIT)/24T/M6142S
  • 螞蟻淘/小鼠白細胞介素12 ELISA試劑盒(Mouse IL-12/23(P40) ELISA KIT)/24T/M6142S

螞蟻淘/小鼠白細胞介素12 ELISA試劑盒(Mouse IL-12/23(P40) ELISA KIT)/24T/M6142S

價格: ¥952.00 市場價: 1586.67

貨號: M6142S
品牌: ebiomall
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    • 產品概述:儲存條件 4℃避光保存,有效期見外包裝。開封后,保存溫度詳見說明書。

      組分

      24T

      48T

      96T

      使用方法

      開封后保存條件

      A.標準品

      1000 pg

      1000 pg

      2×1000 pg

      按說明書進行稀釋

      -20℃可存放一月

      B.標準稀釋液

      16 mL

      16 mL

      16 mL

      即用型

      4℃可存放一月

      C.濃縮生物素化抗體(100×)

      30 μL

      60 μL

      2×60 μL

      按說明書進行稀釋

      (現(xiàn)配現(xiàn)用)

      D.生物素化抗體稀釋液

      16 mL

      16 mL

      16 mL

      即用型

      E.濃縮酶結合物(避光100×)

      30 μL

      60 μL

      2×60 μL

      按說明書進行稀釋

      (現(xiàn)配現(xiàn)用)

      F.酶結合物稀釋液

      16 mL

      16 mL

      16 mL

      即用型

      G.濃縮洗滌液(20×)

      16 mL

      16 mL

      25mL

      即用型

      H.顯色劑(避光)

      6 mL

      6 mL

      12mL

      即用型

      I.終止液

      12mL

      12mL

      12mL

      即用型

      4℃或常溫保存

      J.預包被96孔板

      8×3

      8×6

      8×12

      即用型

      密封干燥4℃保存

      K.封板膠紙

      1張

      2張

      4張

      即用型

      注:終止液和顯色劑具有腐蝕性,一旦接觸到液體,請盡快用大量清水沖洗。

      產品介紹 Mouse IL-12/23 (p40) ELISA Kit (Mouse Interleukin-12/23 (p40) Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ,即小鼠白細胞介素 12 ELISA 試劑盒,可以定量檢測小鼠血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液等樣本中的天然和重組 IL-12/23 (p40)濃度。白細胞介素 12,也稱為自然殺傷細胞刺激因子或細胞毒性淋巴細胞成熟因子,是一種多效性細胞因子,主要由活化的巨噬細胞、樹突狀細胞和中性粒細胞產生,有致炎作用和免疫調節(jié)作用。IL-12 的是由二硫鍵相連異源二聚體,70 kDa (p70)的異二聚體糖蛋白由 40 kDa (p40)和 35 kDa (p35)兩個亞基組成。p40 和 p35 亞基沒有 IL-12 的活性,但 p40 同型二聚體可與 IL-12 的受體結合,是 IL-12 的拮抗劑。IL-12 等電點為 pH4.5-5.5。小鼠 IL-12 P35 有 193 個氨基酸殘基,與人 IL-12 P35 有 66%同源性,小鼠 P40 有 313 個氨基酸殘基與人 P40 有 70%同源性。鼠 IL-12 對人類和小鼠細胞均有活性,人IL-12 作用有種屬特異性,人 IL-12 對小鼠細胞作用甚微。IL-12 的生物學功能包括體外效應和體內效應。體外效應:IL-12 能誘導 PHA 刺激的 T 細胞增殖。IL-12 能增加 CD56 +NK 細胞的活性;誘導 NK 細胞或 PBMC 增殖和產生 LAK 活性,增加 NK 細胞表達表面分子;促進 NK 細胞產生 IFN-γ 和 TNF-α(TGF-β和 IL-10 抑制該效應)。IL-12 在 BCG 和 LPS 誘導的小鼠炎性休克所致的死亡中起重要作用。IL-12 通過誘導 TNF-α和 IFN-γ,抑制骨髓造血。IL-12 還有抗血管生成作用。體內效應:將 IL-12 輸入動物體內可以增強 NK 細胞的殺傷活性、增加 IFN-γ分泌、啟動造血細胞大量生成、增強異體排斥反應并可能介導抗腫瘤效應。IL-12 在某些 Th1 介導的自身免疫疾病中起重要作用。IL-12 誘導動物脾腫大,其中含有大量造血細胞,紅細胞系、髓樣細胞系和巨核細胞系都增加。IL-2 抑制骨髓造血的作用可能與誘導 NK 細胞產生 IFN-γ等有關。在小鼠腫瘤模型中,IL-12 的抗腫瘤作用依賴 IFN-γ的增加,且與 IL-2、IFN-α以及一些化學治療藥物有協(xié)同抗腫瘤作用。IL-12 發(fā)揮生物學效應所需的細胞因子濃度很低(≤pM), 與合適劑量 IL-2 聯(lián)合應用可降低 IL-2 用量,同時提高 CTL、NK、LAK 的殺傷活性,因此 IL-12 可能成為一種新的抗腫瘤生物制劑。本試劑盒采用雙抗體夾心 ELISA 法檢測樣品中小鼠 IL-12/23 (p40)濃度。在小鼠 IL-12/23 (p40)單克隆抗體預包被酶標板中加入適度稀釋的樣品和標準品,其中的 IL-12/23 (p40)會與其單抗結合,洗去游離成分;加入生物素化的抗小鼠 IL-12/23 (p40)抗體,抗小鼠 IL-12/23 (p40)抗體與結合在單抗上的小鼠 IL-12/23 (p40)結合而形成免疫復合物,洗去游離的成分;加入辣根過氧化物酶標記的親合素,生物素與親合素特異性結合,洗去未結合的酶結合物;加入顯色劑,若反應孔中有 IL-12/23 (p40),辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑出現(xiàn)藍色;加終止液變?yōu)辄S色。在 450 nm 下測 OD 值,小鼠 IL-12/23 (p40)濃度與 OD 450 值之間呈正比,可通過繪制標準曲線計算出樣品中小鼠 IL-12/23 (p40)濃度。
      說明書:UE-M6142S/M6142M/M6142L
      常見問題解答:◆背景信號強是什么原因?1.洗板不充分。將洗滌緩沖液加入孔中洗滌,確??讌^(qū)域洗滌充分;確保已在洗滌前棄去所有殘留抗體溶液;增加洗滌次數(shù)。2.鏈親和素-HRP結合物過量。檢查偶聯(lián)物的稀釋度,在推薦的稀釋度下使用。3.封閉不充分。檢查封閉液;延長封閉時間。4.孵育時間過長??s短孵育時間。5.樣品或標準品中含干擾物質。設置對照。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。

      ◆沒有信號?1.試劑添加順序錯誤或試劑配制不正確。重復實驗;檢查試劑配制方法;復核試驗試劑添加流程。2.HRP被疊氮化合物污染。使用新鮮配制的試劑。3.抗體用量不足。檢查是否使用了推薦的抗體量;增加抗體用量(濃度)。4.使用了含胎牛血清的緩沖液復溶抗體。檢查使用的試劑。5.捕獲抗體與板結合較差。使用ELISA板,而非組織培養(yǎng)板;使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。◆整塊板呈現(xiàn)規(guī)則藍色?1.洗板不充分或跳過洗滌步驟未去除殘留的非結合過氧化物酶。嚴格按照說明書洗滌流程操作。2.底物溶液預混太早不新鮮。底物溶液混合后須立即使用。3.封板膠紙或試劑儲液槽重復使用導致HRP殘留污染。每步均需使用新的封板膠紙或試劑儲液槽。4.緩沖液有金屬或HRP污染。新鮮配置緩沖液。◆標準曲線差?1.鏈親和素-HRP結合物量不足。檢查倍性稀釋是否正確。2.捕獲抗體與板結合較差。使用酶標板,而非組織培養(yǎng)板;使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。3.檢測抗體量不足。檢查稀釋度是否正確。4.孵育時間不足。延長底物溶液孵育時間。5.實驗操作流程有誤。嚴格按照說明書操作流程。6.標準曲線稀釋計算錯誤。重新計算制作新的標準曲線。

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