產(chǎn)品概述:產(chǎn)品內(nèi)容 組分
S6011S (5-20 μg)
S6011M (20-50 μg)
S6011L (50-100 μg)
|
A: Dye vial
1 vial
1 vial
1 vial
|
B: Super-n-stain? reaction buffer, 10 ×
1 vial of 15 μL
1 vial of 15 μL
1 vial of 30 μL
|
C: Super-n-stain? antibody storage buffer
1 vial of 60 μL
1 vial of 150 μL
1 vial of 300 μL
|
D: Ultrafiltration vial (MWCO=10K)
1 each
1 each
1 each
|
染料信息
Super-n-stain? Antibody Labeling Kit
貨號(hào)
|
Label Dye
Ex (nm)
Em (nm)
1 × (5-20 μg)
1 × (20-50 μg)
1 × (50-100 μg)
|
Biotin
N/A
N/A
S601101S
S601101M
S601101L
|
FITC
494
518
S601102S
S601102M
S601102L
|
YF?350 SE
347
448
S601103S
S601103M
S601103L
|
YF?405S SE
404
431
S601104S
S601104M
S601104L
|
LS405 SE
408
452
S601105S
S601105M
S601105L
|
YF?488(6)-2 SE
490
515
S601106S
S601106M
S601106L
|
YF?532 SE
527
558
S601107S
S601107M
S601107L
|
YF?555 SE
555
565
S601121S
S601121M
S601121L
|
YF?568 SE
562
583
S601108S
S601108M
S601108L
|
YF?594 SE
590
617
S601109S
S601109M
S601109L
|
YF?640 SE
642
662
S601112S
S601112M
S601112L
|
YF?647A SE
650
665
S601113S
S601113M
S601113L
|
YF?660 SE
663
682
S601114S
S601114M
S601114L
|
YF?750 SE
750
777
S601120S
S601120M
S601120L
|
儲(chǔ)存條件
-20℃保存,有效期見(jiàn)外包裝。產(chǎn)品應(yīng)用Super-n-stain? 抗體標(biāo)記試劑盒包含您需要的利用本公司YF 染料或生物素(Biotin)迅速標(biāo)記抗體的所有組分。標(biāo)記過(guò)程只需將抗體和染料簡(jiǎn)單混合于試劑盒內(nèi)提供的反應(yīng)緩沖溶液中,進(jìn)行短時(shí)間的孵育即可。Super-n-stain? 染料在標(biāo)記結(jié)束時(shí)不再反應(yīng),因此無(wú)需進(jìn)一步純化步驟。標(biāo)記后,約4-6分子染料與1分子抗體共價(jià)結(jié)合。Super-n-stain?是共價(jià)標(biāo)記,所以用它標(biāo)記的抗體可以用于多色熒光染色,而不會(huì)發(fā)生抗體間的染料轉(zhuǎn)移現(xiàn)象。Super-n-stain? 標(biāo)記可以兼容NaN3、低濃度的甘油、Tris和甘氨酸。試劑盒里提供的微型超濾離心管可以在標(biāo)記前快速去除不兼容的小分子抗體穩(wěn)定劑。標(biāo)準(zhǔn)Super-n-stain? 標(biāo)記步驟可以用于多于IgG (μg) 4倍的BSA或明膠樣品。根據(jù)您希望標(biāo)記的IgG量來(lái)選擇試劑盒大小。優(yōu)化標(biāo)記步驟適用于穩(wěn)定蛋白質(zhì)過(guò)?;蚋顾腎gG樣品。在這種情況下,根據(jù)需要標(biāo)記抗體樣本的蛋白質(zhì)總量(IgG + 穩(wěn)定劑,或腹水中總蛋白量)來(lái)選擇試劑盒大小。優(yōu)化步驟也可用于標(biāo)記IgG量低于最低范圍的樣品,通過(guò)添加穩(wěn)定劑蛋白使總蛋白量達(dá)到試劑盒的標(biāo)記范圍。優(yōu)化步驟不建議用于標(biāo)記天然抗血清或雜交瘤細(xì)胞株培養(yǎng)上清,因?yàn)檫@些樣本的抗體含量相對(duì)于總蛋白非常低。當(dāng)用熒光標(biāo)記抗體直接進(jìn)行免疫熒光時(shí),您可能需要使用更高濃度的抗體來(lái)實(shí)現(xiàn)類似間接免疫熒光法檢測(cè)(一抗加標(biāo)記二抗)染色的強(qiáng)度。在我們的內(nèi)部測(cè)試中發(fā)現(xiàn),間接免疫熒光染色結(jié)果是直接免疫熒光染色信號(hào)的三倍左右。標(biāo)記二抗仍可以連接到使用Super-n-stain? 試劑盒標(biāo)記的一抗上,因此如果多個(gè)來(lái)自同一物種的抗體用于多色免疫熒光染色法,二抗無(wú)法區(qū)分同一物種來(lái)源的未標(biāo)記的一抗和使用Super-n-stain? 試劑盒標(biāo)記的一抗。Super-n-stain?標(biāo)記抗體可以用作傳統(tǒng)間接免疫熒光法檢測(cè)后的三級(jí)染色。UElandy 還提供生物素Super-n-stain? 標(biāo)記試劑盒、二次檢測(cè)使用的YF 染料標(biāo)記的鏈霉親和素或YF染料標(biāo)記的單克隆生物素抗體。我們還提供酶標(biāo)記和熒光蛋白標(biāo)記的 Super-n-stain?試劑盒,以及小配體標(biāo)記試劑盒(請(qǐng)?jiān)L問(wèn)www.uelandy.com)。更多信息,請(qǐng)參見(jiàn)常見(jiàn)問(wèn)題。
常見(jiàn)問(wèn)題解答:◆實(shí)驗(yàn)過(guò)程中沒(méi)有純化步驟,我如何將未標(biāo)記上的熒光染料除去?該問(wèn)題描述了我們研發(fā)的關(guān)鍵因素,我們獨(dú)特的染料、緩沖液組分以及完善的標(biāo)記策略已經(jīng)完美地解決了這個(gè)問(wèn)題,具體機(jī)制涉及專利保護(hù),不便透露。◆Super-n-stain? 試劑盒可用于多色免疫標(biāo)記嗎,不同抗體間是否會(huì)發(fā)生染料轉(zhuǎn)移?Super-n-stain? 試劑盒抗體與染料是共價(jià)結(jié)合方式,不存在染料擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移現(xiàn)象。詳細(xì)信息請(qǐng)參照上面產(chǎn)品說(shuō)明部分。◆Super-n-stain? 試劑盒可用于標(biāo)記抗體以外的蛋白嗎?該試劑盒是針對(duì) IgG 抗體標(biāo)記優(yōu)化設(shè)計(jì)的,不推薦用于標(biāo)記其它蛋白。Super-n-stain? 標(biāo)記條件可能會(huì)導(dǎo)致 IgM 變性。◆Super-n-stain? 試劑盒標(biāo)記一抗和二抗的靈敏性是否一樣?直接免疫熒光檢測(cè)信號(hào)會(huì)弱于間接檢測(cè),詳細(xì)信息請(qǐng)參照上面產(chǎn)品說(shuō)明部分。◆用標(biāo)記二抗的間接標(biāo)記相比,直接標(biāo)記復(fù)合物有哪些優(yōu)勢(shì)?直接免疫染色避免了二抗孵育和清洗的步驟,容許來(lái)自同一物種的多個(gè)抗體同時(shí)使用進(jìn)行多色檢測(cè),可以使用來(lái)自同一物種的抗體進(jìn)行動(dòng)物組織染色,從而避免了二抗的交叉反應(yīng)。◆Super-n-stain? 試劑盒與 Invitrogen’s Zenon 抗體標(biāo)記試劑盒相比,有哪些優(yōu)勢(shì)?主要優(yōu)勢(shì):1. YF 染料與抗體共價(jià)結(jié)合避免了多重染色時(shí)染料轉(zhuǎn)移和擴(kuò)散現(xiàn)象;2. Super-n-stain? 復(fù)合物在儲(chǔ)液中可穩(wěn)定保存幾個(gè)月之久,而 Zenon 標(biāo)記物必須在 30min 內(nèi)使用;3. Super-n-stain? 復(fù)合物體積更小些,因?yàn)槿玖现苯优c抗體結(jié)合,而 Zenon 復(fù)合物與抗體片段配合使用;4. 無(wú)需進(jìn)行 YF 染料與標(biāo)記蛋白的比例優(yōu)化,直接混合、染色即可;5. 無(wú)需進(jìn)行后染固定;6.沒(méi)有種屬特異性◆Super-n-stain? 試劑盒與 Innova Bioscience Lightning-link 快速抗體標(biāo)記試劑盒相比,有哪些優(yōu)勢(shì)?
Super-n-stain? 試劑盒使用熒光更亮、光穩(wěn)定性更好的 YF 染料,試劑盒規(guī)格更靈活,可提供至單個(gè)抗體標(biāo)記反應(yīng)。
◆什么是 YF 染料?
YF 染料是一種水溶性較好、用于標(biāo)記蛋白和核酸的小分子有機(jī)染料。我們可提供多達(dá) 20 種的此類 YF 染料。◆我應(yīng)如何選擇 Super-n-stain? 試劑盒?
每種 YF 染料,我們都提供三種不同抗體標(biāo)記量的試劑盒,分別是:5-20 μg, 20-50 μg, 50-100 μg。對(duì)于沒(méi)有穩(wěn)定劑的抗體標(biāo)記,根據(jù)抗體規(guī)格,選擇其中一種即可,含有穩(wěn)定劑的抗體標(biāo)記,請(qǐng)參考產(chǎn)品描述中的表 1。
◆若待標(biāo)記抗體總量適用于兩種 Super-n-stain? 試劑盒,我應(yīng)如何選擇?
例如:標(biāo)記 50 μg 抗體,我應(yīng)購(gòu)買(mǎi) 50-100 μg 抗體標(biāo)記試劑盒還是 20-50μg 的試劑盒?
遇到這種情況,兩種規(guī)格都可以得到較好的結(jié)果,使用較小規(guī)格的效果更好。
◆如何選擇染料與蛋白的比例獲得較好的標(biāo)記效果?
如果待標(biāo)記的抗體量在試劑盒范圍內(nèi),無(wú)需改變?nèi)玖狭炕蚍磻?yīng)時(shí)間,因?yàn)?Super-n-stain? 試劑盒中染料和反應(yīng)緩沖液可以確保較好的標(biāo)記效果。◆我可以拆分試劑盒組分,以便多次使用嗎?不行,因?yàn)?Super-n-stain? 試劑盒已經(jīng)優(yōu)化至一個(gè)標(biāo)記單位,我們不建議拆分試劑盒以標(biāo)記多個(gè)抗體或多次使用。◆抗體濃度是否影響標(biāo)記效率?Super-n-stain? 試劑盒較好的標(biāo)記抗體濃度為 0.5-1 mg/mL,您可通過(guò)濃縮或稀釋使待標(biāo)記抗體達(dá)到上述濃度范圍,小于或超過(guò)該濃度范圍,會(huì)導(dǎo)致標(biāo)記效率過(guò)低或過(guò)多。◆使用標(biāo)記后的抗體進(jìn)行免疫熒光染色未觀察到熒光信號(hào)?與供應(yīng)商聯(lián)系,確??贵w組分、濃度在容許范圍內(nèi)。◆使用標(biāo)記后的抗體進(jìn)行免疫熒光染色未觀察到熒光信號(hào)怎么辦?
與供應(yīng)商聯(lián)系,確??贵w組分、濃度在容許范圍內(nèi)。在直接標(biāo)記前,應(yīng)確定用于間接標(biāo)記的一抗的敏感性和特異性。為了得到與間接標(biāo)記相同的信號(hào)強(qiáng)度,直接標(biāo)記時(shí)需要使用更高濃度的一抗,更多信息請(qǐng)參考產(chǎn)品應(yīng)用部分。共價(jià)標(biāo)記可能會(huì)影響某些抗體的反應(yīng)活性。可以通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定是否是這一因素的原因,即使用 Super-n-stain? 標(biāo)記的一抗和熒光標(biāo)記的二抗進(jìn)行間接免疫染色,以確定 Super-n-stain? 標(biāo)記后的一抗是否仍具有反應(yīng)活性。如果有兼容 YF 染料的激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)的熒光讀膠儀或掃描儀,可以通過(guò) SDS-PAGE 電泳確定抗體是否標(biāo)記上染料,取 0.1-0.5 μg 標(biāo)記抗體進(jìn)行變性 SDS-PAGE電泳,然后進(jìn)行凝膠拍照,你應(yīng)該可以觀察到 IgG 的 55 kDa 的重鏈和 25 kDa 的輕鏈對(duì)應(yīng)的兩條熒光條帶。