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產(chǎn)品介紹 Swine IL-6 ELISA Kit (Swine Interleukin-6 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即豬白細胞介素 6 ELISA 試劑盒，可以定量檢測豬血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液等樣本中的天然和重組 IL-6 濃度。 白細胞介素 6 是一種多效性的、具有α-螺旋結(jié)構(gòu)、磷酸化和易變地糖基化位點的細胞因子，分子量為 22-28 kDa，在調(diào)節(jié)急性期反應、炎癥反應、造血功能、骨代謝和癌癥研究中發(fā)揮至關(guān)重要的作用。豬的 IL-6 成熟肽由 183 個氨基酸組成，與人、小鼠、大鼠 IL - 6 分別具有 58%、39%和 39% 的同源性。多種細胞均可表達 IL-6，包括細胞毒性 T 細胞、成纖維細胞、滑膜細胞、脂肪細胞、成骨細胞、巨核細胞、內(nèi)皮細胞。IL-6 對免疫應答、急性期反應、造血和神經(jīng)系統(tǒng)有多方面作用。IL-6 的生物學活性主要包括調(diào)節(jié)免疫應答、調(diào)節(jié)造血系統(tǒng)、誘導急性期蛋白、調(diào)節(jié)腫瘤生長、調(diào)節(jié)神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)和其它等 6 個方面。IL-6 與臨床上多種疾病的發(fā)生均有關(guān)系。與自身免疫性疾病，腫瘤均有密切的關(guān)系。IL-1和 TNF-α對 IL-6 引起的病理損傷可能有協(xié)同作用。應用 IL-6 治療放療、化療所致血小板減少癥，癌癥以及作為疫苗佐劑已進入臨床試驗。 本試劑盒采用雙抗體夾心 ELISA 法檢測樣品中豬 IL-6 濃度。在豬 IL-6 單克隆抗體預包被酶標板中加入適度稀釋的樣品和標準品，其中的 IL-6 會與其單抗結(jié)合，洗去游離成分；加入生物素化的抗豬 IL-6 抗體，抗豬 IL-6 抗體與結(jié)合在單抗上的豬 IL-6 結(jié)合而形成免疫復合物，洗去游離的成分；加入辣根過氧化物酶標記的親合素，生物素與親合素特異性結(jié)合，洗去未結(jié)合的酶結(jié)合物；加入顯色劑，若反應孔中有 IL-6，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑出現(xiàn)藍色；加終止液變?yōu)辄S色。在 450 nm 下測 OD 值，豬 IL-6 濃度與 OD 450 值之間呈正比，可通過繪制標準曲線計算出樣品中豬 IL-6 濃度。
UE-S6158S/S6158M/S6158L◆沒有信號？1.試劑添加順序錯誤或試劑配制不正確。重復實驗；檢查試劑配制方法；復核試驗試劑添加流程。2.HRP被疊氮化合物污染。使用新鮮配制的試劑。3.抗體用量不足。檢查是否使用了推薦的抗體量；增加抗體用量（濃度）。4.使用了含胎牛血清的緩沖液復溶抗體。檢查使用的試劑。5.捕獲抗體與板結(jié)合較差。使用ELISA板，而非組織培養(yǎng)板；使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。◆整塊板呈現(xiàn)規(guī)則藍色？1.洗板不充分或跳過洗滌步驟未去除殘留的非結(jié)合過氧化物酶。嚴格按照說明書洗滌流程操作。2.底物溶液預混太早不新鮮。底物溶液混合后須立即使用。3.封板膠紙或試劑儲液槽重復使用導致HRP殘留污染。每步均需使用新的封板膠紙或試劑儲液槽。4.緩沖液有金屬或HRP污染。新鮮配置緩沖液。◆標準曲線差？1.鏈親和素-HRP結(jié)合物量不足。檢查倍性稀釋是否正確。2.捕獲抗體與板結(jié)合較差。使用酶標板，而非組織培養(yǎng)板；使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。3.檢測抗體量不足。檢查稀釋度是否正確。4.孵育時間不足。延長底物溶液孵育時間。5.實驗操作流程有誤。嚴格按照說明書操作流程。6.標準曲線稀釋計算錯誤。重新計算制作新的標準曲線。
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